本文探索建立血液、毛发中依托咪酯的QTRAP-LC-MS/MS定性定量检测方法.选取可卡因-D3为内标,血液经乙腈(血液/乙腈体积比1/6)沉淀蛋白,高速离心;毛发(约20 mg)经球磨仪研磨后,采用甲醇超声提取30 min,过有机滤膜,以0.1％(体积分数)甲酸/水溶液和0.1％(体积分数)甲酸/乙腈作为流动相,ACQUITY UPLC?C18(2.1 mm × 100 mm × 1.7 μm)色谱柱分离,以电喷雾正离子多反应监测/信息依赖性采集/增强离子扫描(MRM-IDA-EPI),结合二级谱库检索分析.结果显示,血液中依托咪酯在1.0～100.0 ng/mL范围内线性关系良好(r＞0.995);毛发中依托咪酯在0.05～5.0 ng/mg范围内线性关系良好(r＞0.995),血液、毛发方法检出限(S/N≥3)分别为0.2 ng/mL、0.002 ng/mg,定量限(S/N≥10)分别为 0.5 ng/mL、0.005 ng/mg;1.0、10.0、100.0 ng/mL 血液和 0.5、2.5、5.0 ng/mg 毛发低、中、高添加浓度水平回收率分别为97.1％～103.4％、84.0％～99.8％,相对标准偏差均小于15％.该方法可满足司法实践中对依托咪酯滥用者血液、毛发的定性定量分析.