本文采用程序升温进样技术结合气相色谱-三重四极杆质谱仪建立了全血中的5种常见兽用麻醉剂(替来他明、赛拉唑、氯胺酮、甲苯噻嗪、唑拉西泮)检验方法.以NaCl作为盐析剂、乙腈作为萃取剂,采用盐析辅助液液萃取法作为前处理方法,并使用小型QuEChERS净化柱对提取液进行净化.提取液采用程序升温进样技术结合气相色谱-三重四极杆质谱仪进行分析,能最大程度去除提取液体系中的乙腈溶剂.采用多反应监测模式进行检测,三组特征离子对进行定性检验,外标法进行定量分析,并对方法进行了确证.结果表明,全血中5种常见兽用麻醉剂检出限为10～20 ng/mL,定量限为20～40 ng/mL.在20～2 000 ng/mL(甲苯噻嗪为40～2 000ng/mL)范围内表现良好(r＞0.998),不同浓度的添加样品回收率为71.61％～119.10％,日内精密度(RSD)为0.34％～14.81％,日间精密度(RSD)为4.03％～14.87％.本文建立的方法前处理简便、稳定性好、灵敏度高,具有广阔的开发前景,可用于实际案件检验.