本文建立高效液相色谱-三重四极杆串联质谱仪(HPLC-MS/MS)检测毛发和尿液中依托咪酯及其代谢物依托咪酯酸的检测方法.毛发样品经研磨粉碎后,经甲醇超声提取,尿液样品经乙腈沉淀蛋白高速离心过0.22 μm 滤膜后,采用 Agilent Eclipse Plus C18 RRHD(3.0 mm × 150 mm × 1.8 μm)色谱柱,以 0.1％甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.5 mL/min;选择电喷雾离子源,多反应监测(MRM)正离子模式进行监测.实验表明,尿液中依托咪酯和依托咪酯酸在0.5～50ng/mL的浓度范围,毛发中依托咪酯和依托咪酯酸在0.025～2.5 ng/mg浓度范围内线性关系良好,R2值均大于0.992 5,提取回收率为91.0％～107.5％,日内和日间精密度RSD为0.4％～7.4％,日内和日间准确度为91.5％～110.8％.对实际案例中的6份毛发和4份尿液样本进行检测,检测结果表明,6份毛发均检出依托咪酯原体,其中2份毛发检出代谢物依托咪酯酸且含量远低于原体;4份尿液中2份检出依托咪酯和代谢物依托咪酯酸且代谢物含量远高于原体.本文建立的方法能快速对吸食依托咪酯人员的毛发和尿液中依托咪酯及代谢物进行定性定量分析.