本文探究9个非编码Piwi-interacting RNA(piRNA)分子在法医常见体液中的表达差异,利用统计学方法 评估靶标分子的体液区分能力,为法医学中常见体液(斑)鉴定提供方法补充.研究收集120份法医常见的人源体液样本(包括外周血、月经血、精液、唾液和阴道分泌液),采用实时荧光定量PCR法检测5种体液中靶标piRNAs分子的表达,并用Genorm、NormFinder、BestKeeper软件和△Ct四种方法评估3种内参的稳定性,分析其在各体液中的相对表达量△Cq的差异性,筛选出9个可用于体液区分的标记分子.针对当前法医唾液和阴道分泌液区分的难点问题,本研究利用多分子组合建立支持向量机分类模型(support vector machine,SVM)实现唾液和阴道分泌液的鉴定.此外,通过检测模拟案件样本中piRNAs的相对表达量变化评估该类小分子的稳定性.本研究筛选出9个可用于体液斑迹鉴定的标记分子,利用其中3个piRNAs分子piR-33151、piR-31662、piR-31925组合,建立起SVM分类模型可用于唾液和阴道分泌液的有效鉴别,准确性可达100％.3个分子在室内晾干12个月或紫外照射48 h的样本中仍可检测出.本研究结果 表明:piRNAs分子在不同体液中的相对表达具有显著性差异,具有鉴别法医学中常见体液类型的能力,建立的分类模型可高效准确地区分唾液、阴道分泌液,具有较大的应用潜力.